賴(lài)氨大黃酸與大黃酸對大鼠膽汁淤積性肝纖維化

肝纖維化是指細胞外基質(zhì)的合成和降解的不平衡導致肝臟纖維結締組織過(guò)度沉積，是多種原因引起的慢性肝病向肝硬化發(fā)展所經(jīng)歷共有的病理改變和必經(jīng)途徑[1]。目前研究表明，進(jìn)行抗纖維化治療可以顯著(zhù)降低肝纖維化程度，可以逆轉肝纖維化[2]。大黃酸（Rhein）是一種蒽醌類(lèi)化合物，是大黃、何首烏、虎杖等傳統中藥的主要有效成分之一。研究表明大黃酸除具有抑制腫瘤細胞增殖[3-4]、抗炎[5]、抗菌及調節腎功能等功效，還具有保肝和抗肝纖維化的藥理作用[6]，然而，水溶性較差的大黃酸，限制其進(jìn)一步應用，為改善其水溶性，以賴(lài)氨酸作為溶劑對大黃酸的結構進(jìn)行改造獲得水溶性較好的賴(lài)氨大黃酸。本研究采用膽總管結扎法建立大鼠肝纖維化模型，形成人為的肝外膽道梗阻，膽汁排泄障礙導致以膠原為主的細胞外基質(zhì)成分合成增多，過(guò)多沉積在肝內竇周間隙形成肝纖維化[7]。此模型與CCL4和DMN等藥物所致化學(xué)損傷動(dòng)物模型[8]相比有顯著(zhù)差異，成模時(shí)間短且肝實(shí)質(zhì)細胞無(wú)明顯壞死[9]，對抗肝纖維化研究中具有重要意義。本研究旨在比較RHL和大黃酸防治BDL肝纖維化的作用。 1 材料與方法 1.1 動(dòng)物、主要試劑和儀器：由天津實(shí)驗動(dòng)物研究所提供SD大鼠，雄性，在22 ℃恒溫、65%~70%的相對濕度環(huán)境中飼養適應2 d后進(jìn)行實(shí)驗。賴(lài)氨大黃酸自制，純度98%，相對分子質(zhì)量：430，室溫儲存； ALT、AST、TBA、TBIL試劑盒，HE染色試劑盒，Masson 染色試劑盒，羥脯氨酸試劑盒購，RIPA裂解液，BCA蛋白濃度測定試劑盒，α-SMA抗體，GAPDH一抗抗體、羊抗兔二抗和羊抗小鼠二抗，免疫組化試劑盒；F6/10-8G型FLUKO 超細勻漿機，5810R低溫高速離心機，Gemini EM熒光讀板機，BX63全自動(dòng)顯微鏡掃描系統，電泳轉印系統、凝膠成像系統，Rayto chemray 240全自動(dòng)生化分析儀。