應用研究
復發(fā)性血栓與蛋白C基因565位點(diǎn)突變相關(guān)性研究
王海平 張素平 闕敢波* 張奕平 劉全芳 張洪彬
【摘要】 【摘要】目的 對1例復發(fā)性血栓患者及其家系成員進(jìn)行抗凝血酶和蛋白C基因突變檢測。方法 采用發(fā)色底物法檢測先證者及其家系成員血漿A T活性和PC活性，采用PCR法對先證者及其家系成員AT基因的7個(gè)外顯子及其側翼內含子序列和PC基因的9個(gè)外顯子和8個(gè)內含子序列分別進(jìn)行擴增，PCR產(chǎn)物純化后直接測序檢測基因突變。
【關(guān)鍵字】 靜脈血栓,復發(fā)性血栓,抗凝血酶,蛋白C,基因突變
中圖分類(lèi)號：文獻標識碼：文章編號：
[Abstract] Objective To detect the mutations of antithrombin and protein C gene in a patient with recurrent thrombosis and its family members. Methods The plasma AT activity and PC activity of probands and their family members were detected by chromogenic substrate method. The seven exons and their flanking intron sequences of the AT gene of proband and their family members were detected by PCR. The 9 exons and 8 intron sequences of the PC gene were amplified separately, and the PCR products were purified and directly sequenced to detect gene mutations. Results Whole-genome sequencing showed that there were a total of 3 mutations in the protein 565 gene of the family member, including the proband. Biochemical tests showed that family members carrying mutations in the 565 locus had decreased protein C activity. Conclusion Considering the mutation of protein 565 gene 565 is a predisposing factor for recurrent thrombotic events.
靜脈血栓（venous thromboembolism，VTE）作為臨床常見(jiàn)的一種疾病[1]，表現為血液在深靜脈腔內異常凝結和管腔阻塞等造成的回流障礙，同時(shí)可伴有遠端靜脈高壓、肢體腫脹、疼痛或淺靜脈擴張等癥狀。VTE的早期報道多見(jiàn)于高加索人群。流行性學(xué)數據顯示亞洲地區VTE的病發(fā)率在（14~57）/（1000000人?年），且存在地域差異[2-6]。此外，人口老齡化、手術(shù)復雜度增加、剖腹產(chǎn)率上升、肥胖、腫瘤患病率上升等諸多因素使得亞洲地區VTE的發(fā)病率成逐年上升趨勢，但現有風(fēng)險因素仍不足以解釋VTE的發(fā)生?？鼓到y是人類(lèi)機體重要的防御系統，與纖溶系統共同維持機體出血和缺血之間的平衡。其中，蛋白C作為抗凝系統重要的組成成員，通過(guò)阻斷因子Va和因子VIIIa活性發(fā)揮抗凝作用。此外，蛋白C還參與機體的一些炎癥反應。PROC基因編碼蛋白C，位于2q14.3，現已發(fā)現至少270個(gè)突變位點(diǎn)與蛋白C活性相關(guān)[7]。根據PROC基因突變情況將蛋白C分為Ⅰ型和Ⅱ型：Ⅰ型表現為蛋白C合成減少，Ⅱ型表現為蛋白C活性降低。565位點(diǎn)突變使得對應堿基由C變?yōu)門(mén)，編碼氨基酸由精氨酸變?yōu)樯彼?，最終影響蛋白C活性。目前關(guān)于此位點(diǎn)的報道較少，尤其是在中國人群。本文我們報道了福建龍巖地區一個(gè)家族兩代蛋白C基因565位點(diǎn)突變與VTE的研究。
1 對象與方法
1.1 家系一般資料
先證者，男，漢族，31歲，BMI 22.56，平素體健，無(wú)高血壓、糖尿病、高血脂、貧血，無(wú)過(guò)敏史，無(wú)抽煙、飲酒，肝腎功能正常，反復下肢深靜脈血栓兩次，第一次骨折后左下肢深靜脈血栓，第二次無(wú)誘因出現右下肢腫脹經(jīng)診斷右下肢深靜脈血栓形成。2016-2-13來(lái)我院就診，訴右下肢腫痛2 d。6年前左腳骨折20余天后出現左下肢腫脹疼痛，當地醫院診斷“左下肢深靜脈血栓形成”，予長(cháng)期口服華法林鈉2.5 mg qn，期間未規律監測INR，2年后自行停藥，偶感左下肢酸脹不適。入院行雙下肢靜脈彩超示：右側髂總靜脈、右下肢靜脈多發(fā)血栓形成；左側股總、腘靜脈陳舊性血栓形成并血流再通（圖2）。予以達肝素鈉注射液5000 IU q12h抗凝治療。2016-2-14行“B超引導右小隱靜脈穿刺置血管鞘+下腔靜脈濾器置入術(shù)＋左下肢深靜脈置管溶栓術(shù)”，術(shù)中尿激酶20萬(wàn)單位灌注溶栓，術(shù)后尿激酶溶液25 mL/h經(jīng)溶栓管泵入溶栓治療5 d，達肝素鈉注射液5000 IU q12h抗凝治療，2016-2-19停用尿激酶，口服華法林鈉片3 mg qn po。2016-2-22局麻下行“下腔靜脈濾器取出術(shù)”。2016-2-23雙下肢靜脈彩超示：右側髂靜脈、右下肢深靜脈未見(jiàn)明顯血栓；左側股總、腘靜脈陳舊性血栓形成并血流再通（圖3）?；颊咭蟪鲈?，門(mén)診隨訪(fǎng)治療。本研究?jì)热莴@院內倫理委員會(huì )批準，所有家族成員均簽署知情同意書(shū)。
